تولید انبوه آنتی بادی مونوکلونال علیه پپتید خارج سلولی cd۲۰ و ارزیابی اتصال اختصاصی آن به سلول های بیان کننده cd۲۰
Authors
abstract
پیش زمینه و هدف: امروزه با پیشرفت فنّاوری هیبریدوما در تولید آنتی بادی های مونوکلونال این امکان فراهم شده که به واسطه این مواد، مارکرهای مختلف سلولی در سطح سلول های نرمال و بدخیم ارزیابی گردد. cd20، فسفوپروتئین غیر گلیکوزیله، یک مارکر مناسب در تشخیص لوسمی و لنفوم ها می باشد که تقریباً در 95 درصد از سلول های b نرمال و بدخیم به جز در سلول های اولیه و پلاسماسل، بیان می گردد. هدف این مطالعه تولید آنتی بادی مونوکلونال برعلیه مارکر cd20 و ارزیابی اتصال اختصاصی آن در سلول های بیان کننده cd20 می باشد.مواد و روش ها: ابتدا موش های balb/c در چهار نوبت با 100 میکروگرم پپتید خارج سلولی cd20، ایمونیزه گردیدند و سپس فیوژن سلول های طحال ایمن ترین موش با سلول های میلومایی sp2/0 به وسیله پلی اتیلن گلیکول( (peg صورت گرفت. کلون مطلوب برای رقت سازی محدود ((limiting dilution انتخاب گردید. تولید انبوه آنتی بادی مونوکلونال به روش مایع آسیت صورت گرفت. تخلیص آنتی بادی مونوکلونال با روش افینیتی کروماتوگرافی پروتئین a انجام شد و با sds-page نیز تأیید گردید. اتصال اختصاصی آنتی بادی با ارزیابی های ایمونولوژیکی مثل الایزا و ایمونوفلورسانس و فلوسایتومتری صورت گرفت.یافته ها: پس از انجام فیوژن سلولی و غربالگری کلون ها، یک کلون مطلوب با جذب نوری((od حدود 2 در آزمون الایزا به دست آمد. با تخلیص مایع آسیت با ستون افینیتی کروماتوگرافی پروتئین a , 5 میلی گرم آنتی بادی مونوکلونال خالص به دست آمد. نتایج sds-page خلوص محصول کروماتوگرافی را تأیید نمود. نتایج الایزا و ایمونوفلورسانس و فلوسایتومتری اتصال اختصاصی به cd20 را نیز تأیید نمود.نتیجه گیری: نتایج نشان می دهد که از آنتی بادی مونوکلونال تولیدشده علیه cd20 می توان در ارزیابی های ایمونولوژیکی نظیر الایزا و ایمونوفلورسانس و فلوسایتومتری استفاده نمود.
similar resources
تولید انبوه آنتی‌بادی مونوکلونال علیه پپتید خارج سلولی CD20 و ارزیابی اتصال اختصاصی آن به سلول‌های بیان‌کننده CD20
Background & Aims: Nowadays, by advent of hybridoma technology in monoclonal antibodies production various cell markers could be evaluated in malignant and non-malignant cells. CD20, non-glycosylated phosphoprotein is as an ideal marker in leukemia and B-cell lymphoma diagnosis which is expressed on more than 95% of normal and neoplastic B-cells except for early B-cells and mature plasma. Th...
full textتولید و کنترل کیفی آنتی بادی مونوکلونال نشان دار با تکنسیم 99m علیه سلول های سرطانی کولون
Background and purpose: Binding a monoclonal antibody to tumor associated antigens is an effective method for cancer therapy because these agents can specifically target malignant cells. In fact, monoclonal antibodies are effective agents for diagnosis, grading and treatment of different kinds of cancers. In this research, a new monoclonal antibody against colon cancer cells was prepared and ...
full textتولید آنتی بادی مونوکلونال علیه آنتی زن های سطح اسپرم انسان
Introduction: As monoclonal antibodies are potential tools for characterization of soluble or cellular surface antigens, use of these proteins has always been considered in infertility and reproduction research. Therefore, in this study, monoclonal antibodies against human sperm surface antigens were produced. Material and Methods: To produce specific clones against human sperm surface antig...
full textبیان آنتی بادی مونوکلونال هرسپتین در سلول های یوکاریوتی و آنالیز کاهش بیان 2 HER در رده های سلولی سرطان پستان
full text
تولید آنتی بادی تک زنجیره ای انسانی شده ضد مارکر cd۲۰ در e.coli
زمینه و هدف: رتوکسی مب (rituximab) آنتی بادی مونوکلونال کایمریک بر ضد آنتی ژن cd20 بوده، به طور گسترده برای درمان لنفومای سلول های b استفاده می گردد. با این وجود سایز بزرگ و ایمنی زایی آنتی بادی های کامل موشی همواره به عنوان مشکل در ایمونوتراپی مطرح بوده است. جهت حل این مشکل می توان از قطعات کوچک آنتی بادی انسانی شده استفاده نمود. هدف از این تحقیق تولید آنتی بادی تک زنجیره ای انسانی به منظور کا...
full textتولید و کنترل کیفی آنتی بادی مونوکلونال نشان دار با تکنسیم ۹۹m علیه سلول های سرطانی کولون
سابقه و هدف: آنتی بادی های مونوکلونال (monoclonal) با توجه به اتصال اختصاصی به آنتی ژن، امروزه به عنوان ابزار تحقیقاتی و عوامل تشخیصی بهسازی می شوند. در این تحقیق آنتی بادی های مونوکلونال بر علیه سلول های سرطان روده تهیه شده و نشان دارسازی آن ها با رادیوایزوتوپ تکنسیم - 99m صورت گرفت.مواد و روش ها: این پژوهش در سه مرحله انجام شد که شامل تهیه سلول های هیبریدوما علیه سلول های سرطانی روده (ht29)، ...
full textMy Resources
Save resource for easier access later
Journal title:
مجله پزشکی ارومیهجلد ۲۵، شماره ۴، صفحات ۳۶۳-۳۷۲
Hosted on Doprax cloud platform doprax.com
copyright © 2015-2023